Большинство культуральных сред разработаны и оптимизированы для развития человеческого эмбриона, но не предназначены для переноса или взаимодействия с жидкостями в матке. В Vitrolife разработали специальную среду для переноса эмбрионов EmbryoGlue, которая содержит факторы стимуляции имплантации – гиалуроновую кислоту и рекомбинантный человеческий альбумин. EmbryoGlue используется в клинической практике с 2003 года и является наиболее документально обоснованной средой для переноса эмбрионов. В ходе многочисленных исследований были доказаны увеличение уровня имплантации и показателя рождаемости1-5.
Гиалуроновая кислота – это гликозаминогликан и ключевая молекула как процессе развития эмбриона, так и в процессе имплантации7-9. Уровень гиалуроновой кислоты в матке изменяется динамически и значительно возрастает в день имплантации10, 11. Хотя это соединение содержится в средах для культивирования эмбрионов G-серии, в EmbryoGlue концентрация гиалуроновой кислоты выше, чтобы соответствовать уровню в матке во время имплантации.
Рекомбинантный альбумин человека (RHA) обладает несколькими преимуществами по сравнению с человеческим альбумином (HSA) или другими белковыми добавками. Выделенный из сыворотки альбумин человека по своей природе гетерогенен и может содержать вещества, способные отрицательно повлиять на развитие эмбриона15-17. Поскольку рекомбинантный альбумин получен синтетически, он не содержит связанных с кровью агентов (например, гормонов, прионов). Также рекомбинантный альбумин является более стабильным продуктом, различия одной партии от другой минимальны15-21. Кроме того, Lane et al.22 продемонстрировали, что при культивировании в присутствии цитрата и рекомбинантного человеческого альбумина у крупного рогатого скота образуются значительно более расширенные бластоцисты. Эти бластоцисты также имели значительно большее количество клеток во внутриклеточной массе и трофэктодерме. Добавление гиалуронана в эту культуральную среду приводило к еще более высоким показателям развития бластоцисты. Это доказывает, что культивирование и перенос с RHA являются не только более безопасным вариантом, но и эффективным.
EmbryoGlue входит в G-Серию сред Vitrolife. Все культуральные среды G-Серии имеют оптимальный ионный состав: осмоляльность и рН всех сред в серии одинаковы.
REF:
1. Urman et al. (2008) Effect of hyaluronan-enriched transfer medium on implantation and pregnancy rates after day 3 and day 5 embryo transfer: a prospective randomized study. Fert Steril 90(3):604-12.
2. Bontekoe S et al. (2010) Cochrane Database Syst Rev. Jul 7;(7):CD007421.
3. Bontekoe S et al.,(2014) Cochrane Database Syst Rev. Feb 25;2:CD007421.
4. Balaban B et al. (2011) Effect of hyaluronan-enriched transfer medium on take home baby rate after day 3 and day 5 embryo transfers: a prospective randomized study. Hum Reprod. July 15(15):i24.
5. Hashimoto S et al. (2014) EmbryoGlue improvespregnancy and implantation rates: Results from a Metaanalysis on almost 10,000 embryo transfers. Reprod BioMed Online. 28(Suppl 1):S7-S8.
6. Gardner DK et al. (1999) Fetal development after transfer is increased by replacing protein with the glycosaminoglycan hyaluronan for mouse embryo culture and transfer. Hum Reprod 14:575-2580.
7. Lee CN and Ax RL (1984) Concentration and composition of glycosaminoglycans in the female bovine reproductive tract. J Dairy Science 67:2006-2009.
8. Suchanek E et al. (1994) Follicular fluid contents of hyaluronic acid, folliclestimulating hormone and steroids relative to the success of in vitro fertilization of human oocytes. Fert Steril 62:347-352.
9. Rodriguez-Martinez H et al. (1998) GAGs and spermatozoa competence in vivo and in vitro. In Gametes: Development and Function pp 239-272 Eds A Lauria, et al. Serono Symposia, Roma.
10. Carson DD et al. (1987) Glycoconjugate synthesis during early pregnancy: hyaluronate synthesis and function. Dev Biol 120:228- 35.
11. Zorn TM et al. (1995) Biosynthesis of glycosaminoglycans in the endometrium during the initial stages of pregnancy of the mouse. Cell Mol Biol 41:97-106.
12. Stojkovic M et al. (2002) Effects of high concentrations of hyaluronan in culture medium on development and survival rates of fresh and frozen-thawed bovine embryos produced in vitro. Reprod 124:141-53.
13. Turley E and Moore D (1984) Hyaluronate binding proteins also bind to fibronectin, laminin and collagen. Biochem Biophys Res Commun 1984 121:808- 814.
14. Yaegashi N et al. (1995) Menstrual cycle dependent expression of CD44 in normal human endometrium. Hum Pathol 26:862-65.
15. Bavister BD (1995) Culture of preimplantation embryos: Facts and artifacts. Hum Reprod Update 1:91-112.
16. Meintjes M (2012) Media composition; macromolecules and embryo growth. Methods Mol Biol. 912:107-27.
17. Morbeck et al. (2014) Composition of protein supplements used for human embryo culture. J Assist Reprod Genet. 12:1703-11.
18. Batt PA et al.(1991) Oxygen concentration and protein source effects the development of preimplantation goat embryos in vitro. Reprod Fertil Dev 3:601- 607
19. McKiernan SH et al. 1992. Different LOTs of bovine serum albumin inhibit or stimulate in vitro development of hamster embryos. InVitro Cell Dev Biol 28A:154- 156.
20. Blake et al. (2002) Protein Supplementation of human IVF culture media. J Assist Reprod Genet. 19:137-43.
21. Leonard et al. (2013) Variability in protein quality used for embryo culture: embryotoxicicity of the stabilizer octanoic acid. Fertil Steril. 100:544- 549.
22. Lane et al. (2003) Cryo-survival and development of bovine blastocysts are enhanced by culture with recombnant albumin and hyaluronan. Mol Reprod Dev 64:70-78
Роль гиалуроновой кислоты
Гиалуроновая кислота – это гликозаминогликан и ключевая молекула как процессе развития эмбриона, так и в процессе имплантации7-9. Уровень гиалуроновой кислоты в матке изменяется динамически и значительно возрастает в день имплантации10, 11. Хотя это соединение содержится в средах для культивирования эмбрионов G-серии, в EmbryoGlue концентрация гиалуроновой кислоты выше, чтобы соответствовать уровню в матке во время имплантации.
Значение рекомбинантного альбумина
Рекомбинантный альбумин человека (RHA) обладает несколькими преимуществами по сравнению с человеческим альбумином (HSA) или другими белковыми добавками. Выделенный из сыворотки альбумин человека по своей природе гетерогенен и может содержать вещества, способные отрицательно повлиять на развитие эмбриона15-17. Поскольку рекомбинантный альбумин получен синтетически, он не содержит связанных с кровью агентов (например, гормонов, прионов). Также рекомбинантный альбумин является более стабильным продуктом, различия одной партии от другой минимальны15-21. Кроме того, Lane et al.22 продемонстрировали, что при культивировании в присутствии цитрата и рекомбинантного человеческого альбумина у крупного рогатого скота образуются значительно более расширенные бластоцисты. Эти бластоцисты также имели значительно большее количество клеток во внутриклеточной массе и трофэктодерме. Добавление гиалуронана в эту культуральную среду приводило к еще более высоким показателям развития бластоцисты. Это доказывает, что культивирование и перенос с RHA являются не только более безопасным вариантом, но и эффективным.
Часть G-серии
EmbryoGlue входит в G-Серию сред Vitrolife. Все культуральные среды G-Серии имеют оптимальный ионный состав: осмоляльность и рН всех сред в серии одинаковы.
REF:
1. Urman et al. (2008) Effect of hyaluronan-enriched transfer medium on implantation and pregnancy rates after day 3 and day 5 embryo transfer: a prospective randomized study. Fert Steril 90(3):604-12.
2. Bontekoe S et al. (2010) Cochrane Database Syst Rev. Jul 7;(7):CD007421.
3. Bontekoe S et al.,(2014) Cochrane Database Syst Rev. Feb 25;2:CD007421.
4. Balaban B et al. (2011) Effect of hyaluronan-enriched transfer medium on take home baby rate after day 3 and day 5 embryo transfers: a prospective randomized study. Hum Reprod. July 15(15):i24.
5. Hashimoto S et al. (2014) EmbryoGlue improvespregnancy and implantation rates: Results from a Metaanalysis on almost 10,000 embryo transfers. Reprod BioMed Online. 28(Suppl 1):S7-S8.
6. Gardner DK et al. (1999) Fetal development after transfer is increased by replacing protein with the glycosaminoglycan hyaluronan for mouse embryo culture and transfer. Hum Reprod 14:575-2580.
7. Lee CN and Ax RL (1984) Concentration and composition of glycosaminoglycans in the female bovine reproductive tract. J Dairy Science 67:2006-2009.
8. Suchanek E et al. (1994) Follicular fluid contents of hyaluronic acid, folliclestimulating hormone and steroids relative to the success of in vitro fertilization of human oocytes. Fert Steril 62:347-352.
9. Rodriguez-Martinez H et al. (1998) GAGs and spermatozoa competence in vivo and in vitro. In Gametes: Development and Function pp 239-272 Eds A Lauria, et al. Serono Symposia, Roma.
10. Carson DD et al. (1987) Glycoconjugate synthesis during early pregnancy: hyaluronate synthesis and function. Dev Biol 120:228- 35.
11. Zorn TM et al. (1995) Biosynthesis of glycosaminoglycans in the endometrium during the initial stages of pregnancy of the mouse. Cell Mol Biol 41:97-106.
12. Stojkovic M et al. (2002) Effects of high concentrations of hyaluronan in culture medium on development and survival rates of fresh and frozen-thawed bovine embryos produced in vitro. Reprod 124:141-53.
13. Turley E and Moore D (1984) Hyaluronate binding proteins also bind to fibronectin, laminin and collagen. Biochem Biophys Res Commun 1984 121:808- 814.
14. Yaegashi N et al. (1995) Menstrual cycle dependent expression of CD44 in normal human endometrium. Hum Pathol 26:862-65.
15. Bavister BD (1995) Culture of preimplantation embryos: Facts and artifacts. Hum Reprod Update 1:91-112.
16. Meintjes M (2012) Media composition; macromolecules and embryo growth. Methods Mol Biol. 912:107-27.
17. Morbeck et al. (2014) Composition of protein supplements used for human embryo culture. J Assist Reprod Genet. 12:1703-11.
18. Batt PA et al.(1991) Oxygen concentration and protein source effects the development of preimplantation goat embryos in vitro. Reprod Fertil Dev 3:601- 607
19. McKiernan SH et al. 1992. Different LOTs of bovine serum albumin inhibit or stimulate in vitro development of hamster embryos. InVitro Cell Dev Biol 28A:154- 156.
20. Blake et al. (2002) Protein Supplementation of human IVF culture media. J Assist Reprod Genet. 19:137-43.
21. Leonard et al. (2013) Variability in protein quality used for embryo culture: embryotoxicicity of the stabilizer octanoic acid. Fertil Steril. 100:544- 549.
22. Lane et al. (2003) Cryo-survival and development of bovine blastocysts are enhanced by culture with recombnant albumin and hyaluronan. Mol Reprod Dev 64:70-78