Сравнительный анализ различных техник переноса ядра с целью предотвращения передачи митохондриальных болезней
Предотвращение митохондриальных болезней (мтДНК) в настоящее время может быть возможно с помощью переноса ядер (NT) клеток зародышевых линий. Однако научных данных для сравнения эффективности различных методов NT для преодоления митохондриальных болезней недостаточно. В нашей работе мы выполнили четыре типа NT, включая перенос первого и второго полярного тела (PB1 / 2T), перенос материнского веретена (ST) и пронуклеарный перенос (PNT), используя модели мышей NZB/OlaHsd и B6D2F1. Развитие эмбрионов оценивали после NT, а уровни переноса мтДНК измеряли методом секвенирования следующего поколения (NGS). Кроме того, мы исследовали два новых протокола (PB2T-a и PB2T-b) для оптимизации PB2T с использованием ооцитов мыши и человека. Хромосомные профили бластоцист после переноса ядра оценивали с помощью NGS. На мышах наши результаты показывают, что только техника PB2T-b успешно приводит к развитию бластоцист. Среди эмбрионов, полученных после PB1T, PB2T-b, ST и PNT наблюдались сопоставимые показатели бластуляции. Кроме того, PB1T и PB2T-b имели более низкие уровни переноса мтДНК, чем ST и PNT. После экстраполяции новой техники PB2T-b на человеческие ооциты, созревшие in vitro (IVM) и ооциты, созревшие in vivo с агрегатами гладкого эндоплазматического ретикулума (SERa), полученные эмбрионы успешно развились в бластоцисты с сопоставимой скоростью с контролем ICSI. Эмбрионы PB2T-b, полученные из ооцитов IVM, показали сходную частоту эуплоидии с контролем ICSI. Тем не менее, наша мышиная модель с немутантными мтДНК отличается от смеси патогенных и непатогенных мтДНК в сценарии переноса ядра у человека. Новый PB2T-b требует дальнейшей оптимизации для повышения частоты бластуляции у человека. Хотя требуется больше работ для выяснения эффективности и безопасности NT, наше исследование предполагает, что PBT может иметь потенциал для предотвращения передачи митохондриальных болезней потомкам.
